Η μοριακή διάγνωση αντιστοιχεί σε ένα σύνολο μοριακών τεχνικών που στοχεύουν στον εντοπισμό αλλαγών στο DNA που μπορεί να είναι ενδεικτικές γενετικών ασθενειών ή καρκίνου, για παράδειγμα. Επιπλέον, οι μοριακές τεχνικές χρησιμοποιούνται ευρέως για την αναγνώριση και επιβεβαίωση των μολυσματικών ασθενειών, καθώς αντιπροσωπεύουν μια ταχύτερη και ακριβέστερη διαγνωστική μέθοδο.
Η μοριακή διάγνωση είναι δαπανηρή και συνεπώς δεν ζητείται πολύ συχνά από τους γιατρούς, αλλά δίνει ακριβή αποτελέσματα όσον αφορά την παρουσία της αλλοίωσης, τον τρόπο με τον οποίο μπορεί να παρεμβαίνει στη λειτουργία του οργανισμού και την ανταπόκριση του ασθενούς στη νόσο. θεραπεία.
Τι είναι αυτό
Η μοριακή διάγνωση μπορεί να πραγματοποιηθεί με διάφορους στόχους, οι κυριότεροι από τους οποίους είναι:
- Προσδιορισμός των μεταλλάξεων που σχετίζονται με λευχαιμία, όπως η ταυτοποίηση της μετατόπισης BCR-ABL, η οποία είναι χαρακτηριστική της χρόνιας μυελογενούς λευχαιμίας (CML).
- Μεταλλαγές που χαρακτηρίζουν αιματολογικές παθήσεις, όπως η κληρονομική αιμοχρωμάτωση, η πολυκυτταρική βέρα, η βασική θρομβοκυταιμία και οι θρομβοφιλίες, για παράδειγμα - κατανοήσουν τι είναι η θρομβοφιλία και πώς γίνεται η θεραπεία.
- Μοριακές αλλαγές που υποδηλώνουν την εμφάνιση καρκίνου, όπως ο καρκίνος του παχέος εντέρου, του πνεύμονα, του μαστού και του εγκεφάλου, για παράδειγμα.
- Διάγνωση μολυσματικών ασθενειών όπως ηπατίτιδα, ουρηθρίτιδα, τοξοπλάσμωση, λεϊσμανίαση, κλπ., Εκτός από την αναγνώριση του ιού HPV .
Η μοριακή διάγνωση, παρά το γεγονός ότι θεωρείται δαπανηρή σε σύγκριση με άλλες διαγνωστικές τεχνικές, είναι ακριβέστερη, καθώς είναι σε θέση να ενημερώνει την αλλοίωση που σχετίζεται με μια συγκεκριμένη ασθένεια και τον βαθμό επίδρασης αυτής της μεταβολής στον οργανισμό, βοηθώντας έτσι τη θεραπεία του ατόμου.
Εκτός από τη χρήση τους για τη διάγνωση διαφόρων ασθενειών, οι μοριακές τεχνικές χρησιμοποιούνται επίσης για την αξιολόγηση της απόκρισης στη θεραπεία, ειδικά σε άτομα με καρκίνο, που είναι μία από τις πιο αποτελεσματικές μεθόδους για την ένδειξη της εξέλιξης της νόσου και της υποτροπής.
Πώς γίνεται
Η μοριακή διάγνωση μπορεί να γίνει με οποιοδήποτε δείγμα και ο γιατρός καλείται να παράσχει πληροφορίες σχετικά με την κατάσταση του ασθενούς, που μπορεί να είναι ούρα, σάλιο ή, κατά το πλείστον, αίμα. Δεν είναι απαραίτητο να γίνουν γρήγορα ή οποιαδήποτε άλλη προετοιμασία για την εξέταση.
Το δείγμα συλλέγεται και αποστέλλεται στο εργαστήριο μαζί με τις συμβουλές του γιατρού που ενημερώνουν την εξέταση ή τον τύπο της έρευνας που πρέπει να γίνει. Η μοριακή τεχνική που εκτελείται εξαρτάται από την απαιτούμενη εξέταση και περιλαμβάνει μια σειρά ακριβών διαδικασιών που αποσκοπούν στον εντοπισμό της παρουσίας ή της απουσίας αλλαγής που ζητά ο γιατρός.
Συνήθως χρησιμοποιείται μόνο ένα μικρό δείγμα δείγματος, το υπόλοιπο αποθηκεύεται έτσι ώστε, εάν είναι απαραίτητο, η δοκιμή να επαναλαμβάνεται.
Δείτε ποιες είναι οι κύριες μοριακές τεχνικές
PCR
Η PCR, σύντομη για την αλυσιδωτή αντίδραση πολυμεράσης, είναι μια μοριακή τεχνική που αποτελείται από την ενίσχυση ενός θραύσματος του γενετικού υλικού, είτε DNA είτε RNA, με στόχο την ταυτοποίηση μεταλλάξεων και, συνεπώς, την υποβοήθηση στη διάγνωση ασθενειών.
Η τεχνική αυτή γίνεται από την εκχύλιση και τον καθαρισμό του γενετικού υλικού, το οποίο στη συνέχεια τοποθετείται σε ένα μείγμα στο οποίο ένα από τα συστατικά είναι ένα περιοριστικό ένζυμο που ποικίλλει ανάλογα με την απαιτούμενη εξέταση και του οποίου η λειτουργία είναι να κόψει το υλικό σε θραύσματα για τον εντοπισμό πιθανής γενετικής αλλαγής. Το μίγμα τοποθετείται σε θερμοκυκλοφορητή, η οποία είναι συσκευή που δρα μέσω της θερμοκρασιακής μεταβολής που υποδεικνύεται από τον επαγγελματία σύμφωνα με την εξέταση και, κατ 'αυτόν τον τρόπο, επιτρέπει την ενίσχυση του γενετικού θραύσματος. Στην περίπτωση της συμβατικής PCR, μετά την ενίσχυση, το προϊόν PCR υποβάλλεται σε ηλεκτροφόρηση, η οποία είναι μια μοριακή τεχνική που βασίζεται στο βάρος και το μέγεθος των θραυσμάτων, δηλαδή σύμφωνα με αυτά τα χαρακτηριστικά δημιουργείται ένα πρότυπο ζωνών, η ανάλυση του οποίου γίνεται με βάση τη ζώνη του θετικού ελέγχου, δηλαδή στη ζώνη που είναι γνωστό ότι αντιστοιχεί στη γενετική αλλοίωση.
Η PCR σε πραγματικό χρόνο, που ονομάζεται επίσης qPCR, είναι ένας τύπος ποσοτικής PCR, δηλαδή, εκτός από τον προσδιορισμό της γενετικής αλλοίωσης, είναι σε θέση να δώσει πληροφορίες για την έκφραση γονιδίων, δηλαδή πόσο το μεταβληθέν γονίδιο εκφράζεται στον οργανισμό, και έτσι μπορούν να χρησιμοποιηθούν για να βοηθήσουν στη διάγνωση και την παρακολούθηση της θεραπείας. Η PCR σε πραγματικό χρόνο δεν απαιτεί ηλεκτροφόρηση, η όλη διαδικασία ενίσχυσης και ανάλυσης του γενετικού υλικού γίνεται από μια συσκευή και το αποτέλεσμα ερμηνεύεται από εκπαιδευμένο επαγγελματία υγείας.
Ακολουθία
Η αλληλούχιση είναι μια μοριακή τεχνική που συνίσταται στον προσδιορισμό της αλληλουχίας νουκλεοτιδίων του DNA. Η αλληλούχιση συμβαίνει από μία αντίδραση τύπου PCR, ωστόσο, στο μίγμα ενίσχυσης, προστίθενται νουκλεοτίδια τροποποιημένα με την προσθήκη φθοροχρωμάτων, ότι καθώς το υλικό ενισχύεται, τα τροποποιημένα νουκλεοτίδια ενσωματώνονται στο ϋΝΑ και παράγουν διάφορα θραύσματα, τα οποία αντιστοιχούν στο προϊόν της αλληλουχίας.
Το προϊόν της αντίδρασης τοποθετείται σε μια συσκευή που ονομάζεται συσκευή προσδιορισμού αλληλουχίας ϋΝΑ, όπου καθώς τα θραύσματα χτυπιούνται από το λέιζερ της συσκευής, τα φθοροχρώματα διεγείρονται, εκπέμποντας φθορισμό, ο οποίος υποδεικνύεται από τη συσκευή μέσω κορυφών, κάθε αντίστοιχη κορυφή σε ένα νουκλεοτίδιο. Στο τέλος της αντίδρασης ο εξοπλισμός θα ενημερώσει την ακολουθία του DNA, βοηθώντας έτσι τον γιατρό στη διάγνωση γενετικών ασθενειών.
