Η βακτηριοσκόπηση είναι μια διαγνωστική τεχνική που επιτρέπει την ταχεία και απλή αναγνώριση της εμφάνισης λοιμώξεων, διότι μέσω τεχνικών ειδικής χρώσης είναι δυνατή η οπτικοποίηση των βακτηριακών δομών στο μικροσκόπιο.
Η δοκιμή αυτή μπορεί να γίνει με οποιοδήποτε βιολογικό υλικό και ο γιατρός πρέπει να υποδείξει το προς συλλογή και την ανάλυση υλικό και το αποτέλεσμα δείχνει αν έχει επαληθευθεί η παρουσία ή η απουσία βακτηρίων καθώς και η ποσότητα και τα χαρακτηριστικά τους.
Τι είναι αυτό
Η βακτηριοσκόπηση είναι μια διαγνωστική εξέταση που μπορεί να γίνει με οποιοδήποτε βιολογικό υλικό και μπορεί να χρησιμοποιηθεί για την ταχεία αναγνώριση των βακτηριακών λοιμώξεων:
- Σεξουαλικά μεταδιδόμενα νοσήματα όπως η γονόρροια και τα χλαμύδια, για παράδειγμα, οι πέοι ή οι κολπικές εκκρίσεις που χρησιμοποιούνται για το σκοπό αυτό. Η συλλογή πραγματοποιείται με τη χρήση αποστειρωμένου στυλεού και αντενδείκνυται να πραγματοποιηθεί η υγιεινή της γεννητικής περιοχής 2 ώρες πριν την εξέταση και να μην γίνει σεξ 24 ώρες πριν τη συλλογή.
- Αμυγδαλίτιδα, επειδή μέσω της συλλογής εκκρίσεων του λαιμού, είναι δυνατόν να εντοπιστούν θετικά κατά Gram βακτήρια που ευθύνονται για φλεγμονή στην αμυγδαλή, με την παρουσία βακτηρίων στρεπτόκοκκων.
- Λοιμώξεις στο ουροποιητικό σύστημα, η οποία γίνεται με την ανάλυση του πρώτου πίδακα των ούρων.
- Φυματίωση, στην οποία αναλύονται τα πτύελα.
- Λοιμώξεις σε χειρουργικά τραύματα, δεδομένου ότι είναι σύνηθες ότι οι λοιμώξεις συμβαίνουν μετά από χειρουργικές επεμβάσεις λόγω της μείωσης του ανοσοποιητικού συστήματος του ατόμου. Έτσι, η συλλογή της έκκρισης του τραύματος με ένα αποστειρωμένο μάκτρο μπορεί να υποδειχθεί για να επιβεβαιωθεί η πιθανή παρουσία βακτηρίων στην περιοχή.
- Τραυματισμοί δέρματος ή νυχιών, που συνίστανται στη συλλογή ενός επιφανειακού δείγματος, να μην χρησιμοποιούνται κρέμες και σμάλτα τουλάχιστον 5 ημέρες πριν από την εξέταση. Παρόλο που μπορεί να γίνει βακτηριοσκόπηση, συνήθως παρατηρούνται μύκητες κατά την εξέταση του δείγματος των νυχιών, για παράδειγμα.
Επιπλέον, η βακτηριοσκόπηση μπορεί να χρησιμοποιηθεί για τη διάγνωση της βακτηριακής μηνιγγίτιδας, των ασθενειών του αναπνευστικού και του γαστρεντερικού σωλήνα και μπορεί να γίνει με βιοψία ή πρωκτικό υλικό.
Έτσι, η βακτηριοσκόπηση είναι μια εργαστηριακή τεχνική που μπορεί να χρησιμοποιηθεί στην κλινική πρακτική για τη διάγνωση ασθενειών που προκαλούνται από βακτήρια, υποδεικνύοντας τα χαρακτηριστικά του αιτιολογικού παράγοντα της νόσου και επιτρέποντας έτσι στον ιατρό να ξεκινήσει τη θεραπεία ακόμα και πριν εντοπιστεί στο εργαστήριο, η οποία μπορεί να διαρκέσει περίπου 1 εβδομάδα.
Πώς γίνεται;
Η εξέταση βακτηριοσκόπησης γίνεται στο εργαστήριο και το υλικό που συλλέγεται από τον ασθενή αναλύεται στο μικροσκόπιο για να διερευνηθεί η απουσία ή παρουσία βακτηριδίων, πέραν των χαρακτηριστικών του.
Η προετοιμασία για την εξέταση εξαρτάται από το υλικό που θα συλλεχθεί και θα αναλυθεί. Στην περίπτωση του κολπικού υλικού, δεν συνιστάται η γυναίκα να υγιεινεύει 2 ώρες πριν από την εξέταση και να μην έχει συνουσία τις τελευταίες 24 ώρες, ενώ στην περίπτωση συλλογής νυχιών ή δερματικού υλικού, για παράδειγμα, συνιστάται να μην περάσει σμάλτο, κρέμες ή ουσίες στο δέρμα πριν από την εξέταση.
Στην περίπτωση ενός δείγματος κολπικής έκκρισης, για παράδειγμα, το στέλεχος που χρησιμοποιήθηκε για να γίνει η συλλογή περνάει με κυκλικές κινήσεις σε μια ολίσθηση, η οποία πρέπει να αναγνωρίζεται με τα αρχικά του ασθενούς και στη συνέχεια να βάφονται με το χρωματισμό Gram. Στην περίπτωση ενός δείγματος πτυέλων, για παράδειγμα, το οποίο είναι το υλικό που συλλέγεται κυρίως για την επαλήθευση της παρουσίας του βακτηρίου που ευθύνεται για τη φυματίωση, η χρώση που χρησιμοποιείται στη βακτηριοσκόπηση είναι αυτή της Ziehl-neelsen, η οποία είναι πιο συγκεκριμένη για αυτόν τον τύπο μικροοργανισμού.
Κανονικά, όταν επαληθεύεται η παρουσία βακτηρίων, το εργαστήριο εκτελεί την ταυτοποίηση του μικροοργανισμού και του αντιβιογράμματος, δίνοντας ένα πιο ολοκληρωμένο αποτέλεσμα.
Πώς γίνεται η βαφή Gram;
Η χρώση του γραμμαρίου είναι μια απλή και γρήγορη τεχνική χρωματισμού που επιτρέπει τη διαφοροποίηση των βακτηρίων ανάλογα με τα χαρακτηριστικά τους, επιτρέποντας τη διαφοροποίηση των βακτηρίων σε θετικά ή αρνητικά ανάλογα με τον χρωματισμό τους, επιτρέποντας την απεικόνισή τους στο μικροσκόπιο.
Αυτή η μέθοδος χρώσης χρησιμοποιεί δύο κύριες χρωστικές, ένα μπλε και ένα ροζ, που μπορεί να λεκιάζουν τα βακτήρια ή όχι. Βακτήρια βαμμένα με μπλε λέγεται ότι είναι θετικά κατά gram, ενώ τα ροζ χρώματα ονομάζονται gram-αρνητικά. Από αυτή την ταξινόμηση, είναι πιθανό ο γιατρός να ξεκινήσει την προληπτική θεραπεία, ακόμη και πριν από την αναγνώριση του μικροοργανισμού.
Κατανοήστε πώς γίνεται η λεύκανση Gram
Η βακτηριακή ταυτοποίηση με τη χρώση του γραμμαρίου είναι γρήγορη, πρακτική και φθηνή και είναι απαραίτητη για τους γιατρούς δεδομένου ότι τα ειδικά χαρακτηριστικά αυτών των ομάδων βακτηρίων είναι γνωστά και ο γιατρός μπορεί να δείξει μια προληπτική θεραπεία βασισμένη μόνο στη χρώση του γραμμαρίου.
Αυτός ο χρωματισμός έχει ως αρχή την διαφοροποίηση των βακτηρίων σύμφωνα με τα χαρακτηριστικά του κυτταρικού τοιχώματος. Τα θετικά κατά Gram βακτήρια έχουν περισσότερα από ένα παχύ τοίχωμα πεπτιδογλυκάνης, είναι σε θέση να συγκρατούν το πρώτο φρεάτιο βαφής, ενώ τα αρνητικά κατά gram βακτήρια έχουν λεπτότερο τοίχωμα και μπορούν εύκολα να αποχρωματιστούν όταν εκτίθενται σε αλκοόλη.
Η χρώση Gram γίνεται σε 5 κύρια στάδια, αλλά το πρωτόκολλο μπορεί να ποικίλει ανάλογα με το εργαστήριο:
- Καλύψτε τη λεπίδα με τη βαφή των ιωδών κρυστάλλων και αφήστε την να δράσει για περίπου 1 λεπτό.
- Πλένετε τη λεπίδα με ένα ρεύμα τρεχούμενου νερού και καλύπτετε τη λεπίδα με lugol, η οποία στοχεύει στη σταθεροποίηση της μπλε χρωστικής και αφήνεται να δράσει για 1 λεπτό. Και οι δύο τύποι βακτηρίων μπορούν να απορροφήσουν το σύμπλοκο που σχηματίζεται από τη βαφή και το lugol,
- Στη συνέχεια, πλύνετε τη λεπίδα με τρεχούμενο νερό και εφαρμόστε αλκοόλη 95%, αφήνοντάς την να δράσει για 30 δευτερόλεπτα. Το αλκοόλ είναι υπεύθυνο για τη διάλυση της λιπιδικής μεμβράνης η οποία σχηματίζει τα αρνητικά κατά Gram βακτηρίδια και έτσι απομακρύνει το σύμπλοκο που σχηματίζεται μεταξύ της βαφής και της λουγκόλης, αποχρωματίζοντας αυτά τα βακτήρια. Ωστόσο, στην περίπτωση των θετικών κατά Gram βακτηρίων, το αλκοόλ εξαντλείται από το κυτταρικό τοίχωμα των θετικών κατά Gram βακτηρίων, προκαλώντας συστολή των πόρων και καθιστώντας τα αδιαπέραστα.
- Κατόπιν ξεπλύνετε κάτω από τρεχούμενο νερό και καλύψτε τη λεπίδα με τη δεύτερη βαφή, φουξίνη ή σαφρανίνη και αφήστε την να δράσει για 30 δευτερόλεπτα.
- Στη συνέχεια η λεπίδα πρέπει να ξεπλένεται με νερό της βρύσης και να αφήνεται να στεγνώσει σε θερμοκρασία δωματίου.
Μόλις στεγνώσει η λεπίδα, είναι δυνατό να τοποθετηθεί μια σταγόνα λαδιού και να παρατηρηθεί η λεπίδα στο μικροσκόπιο με στόχο 100x. Είναι δυνατή η επαλήθευση της παρουσίας ή της παρουσίας βακτηρίων καθώς και η παρουσία ζυμομυκήτων και επιθηλιακών κυττάρων.
Τι σημαίνει το αποτέλεσμα;
Στόχος του αποτελέσματος της βακτηριοσκόπησης είναι να δείξει εάν υπάρχει παρουσία ή απουσία μικροοργανισμών, χαρακτηριστικά και ποσότητα, εκτός από το υλικό που αναλύθηκε.
Το αποτέλεσμα είναι αρνητικό όταν δεν παρατηρούνται μικροοργανισμοί και θετικοί όταν εμφανίζονται οι μικροοργανισμοί. Το αποτέλεσμα συνήθως υποδεικνύεται σε διασταυρώσεις (+), όπου το 1 + υποδεικνύει ότι 1 έως 10 βακτήρια απεικονίστηκαν σε 100 πεδία και θα μπορούσαν να είναι ενδεικτικά μιας αρχικής μόλυνσης, για παράδειγμα, και 6 + αντιπροσωπεύει την παρουσία περισσότερων από 1000 βακτηρίων ανά παρατηρούμενου πεδίου, που αντιπροσωπεύει μια πιο χρόνια μόλυνση ή βακτηριακή αντίσταση, για παράδειγμα, υποδεικνύοντας ότι η θεραπεία δεν είναι αποτελεσματική.
Επιπλέον, είναι γνωστές οι πληροφορίες χρωματισμού που χρησιμοποιήθηκαν στην αναφορά, οι οποίες μπορεί να είναι Gram ή Ziehl-neelsen, για παράδειγμα, εκτός από τα χαρακτηριστικά του μικροοργανισμού, ως μορφή και διάταξη, για παράδειγμα σε συστάδες ή αλυσίδες.
Κανονικά, όταν το αποτέλεσμα είναι θετικό, το εργαστήριο εντοπίζει τον μικροοργανισμό και το αντιβιογράφημα, υποδεικνύοντας ποιο αντιβιοτικό συστήνεται περισσότερο για τη θεραπεία της λοίμωξης από ένα συγκεκριμένο βακτήριο.